高效液相色谱法同时测定银杏叶及其提取物中4种游离黄酮含量（二）

4、加标回收率

对已知芦丁、槲皮素、山奈酚、异鼠李素4种游离黄酮含量的提取物中加入一定量的标准品溶液，加标回收率如表3所示。由表3可知，4种黄酮的加标回收率均在95％～106％之间，该方法定量准确。

5、日内日间精密度

以优化前处理条件处理1批银杏叶和1批银杏叶提取物，每天平行测定6次，测定3d，考察该方法检测银杏叶及银杏叶提取物中游离黄酮含量的日内日间稳定性。结果显示：银杏叶及银杏叶提取物中总游离黄酮日内RSD均小于1％，表明该方法精密度好；日间RSD均小于1.5％，表明该方法稳定性好。

6、银杏叶与银杏叶提取物游离黄酮关系的评价

选取原料1、2、3及相对应的成品1、2、3进行检测，以探究银杏叶与银杏叶提取物之间游离芦丁、槲皮素、山奈酚、异鼠李素之间的关系，结果如表4～7所示。

以游离山奈酚为例分析，原料l和原料2中游离山奈酚含量低于原料3中含量，成品1和2中游离山奈酚含量也低于成品3，故原料中游离黄酮含量与成品中游离黄酮含量呈正相关。以目前的原料和成品分析，可得到原料与对应银杏叶提取物间游离黄酮含量比值平均值为：芦丁为20.950，槲皮素为23.100，山奈酚为17.106，异鼠李素为15.759。这可为银杏叶提取物生产厂家在选择购买银杏叶时提供一定的依据，以期从原料环节控制产品中游离黄酮的含量。

7、市场上部分样品评价

以本文所建方法检测评价收集到的市面上部分银杏叶提取物游离黄酮水平，结果如表8所示。

由表8可知，收集到的银杏叶提取物中游离含量由高到低的顺序为：游离芦丁含量＞游离槲皮素＞游离山柰酚＞游离异鼠李素。其中芦丁含量均高于1.0％，但均可控制在4.0％以内；游离槲皮素与游离山柰酚含量在0.1％左右，游离异鼠李素含量低于0.1％。

三、结论

本文通过优化液相色谱条件及样品前处理条件，建立一种可同时测定银杏叶及其提取物中4种游离黄酮含量的液相色谱法。本方法灵敏度高，其线性范围、精密度、回收率均较好。前处理方法简单，易于操作，仅需加热回流30min即可完成原料中游离黄酮的萃取；仪器方法可较好分离样品中4种游离黄酮，分析时间较短，液相时间为30min。

通过分析原料与对应成品各组分游离黄酮之间的比例关系，为银杏叶的选择采购提供一定的依据。另外通过检测游离黄酮含量，评价了市面上部分银杏叶提取物中游离芦丁、槲皮素、山柰酚、异鼠李素含量水平。

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