超声辅助苦荞中蛋白和黄酮的同步提取工艺（二）

②料液比对苦养蛋白和黄酮类化合物超声同步提取的影响

随着液料比的增大，苦养蛋白和黄酮类化合物得率也随之增大。当液料比达到30∶mL/g时，苦荞蛋白得率达到最大值为8.04％，黄酮类化合物得率为1.18％。随着液料比的继续增加，黄酮得率逐渐增大且趋势平缓，而苦荞蛋白得率逐渐减小。由于液料比过大使提取液浓度过低，在酸沉过程中溶液中的蛋白和黄酮类化合物易流失在上清液中，甚至导致酸不沉析的现象产生。从耗能等综合角度考虑，液料比以30∶mL/g为宜。

③pH对苦养蛋白和黄酮类化合物超声同步提取的影响

在碱性条件下超声同步提取苦荞蛋白和黄酮类物质，随着pH的增大二者的得率也随之增大，说明碱性条件有利于苦养蛋白和黄酮类物质的溶出。当pH为9时，蛋白得率达到最大值7.89％，黄酮得率最大值1.12％。但随着pH的继续增大两者的得率均呈下降趋势。这是因为苦荞蛋白在强碱环境下会产生水解、脱氨以及脱羧等反应，影响理化性质，破坏蛋白质结构，导致蛋白质强烈变性。pH过高也会影响产品色泽以及出现其他副作用，在酸沉过程中也会使溶液中盐分增加，发生盐溶现象。考虑到生产成本以及环保等因素，选用pH为9的溶液进行苦荞蛋白和黄酮类物质的最佳提取条件。

④时间对苦荞蛋白和黄酮类化合物超声辅助同步提取的影响

随着超声时间的延长，苦荞中蛋白和黄酮类物质的得率随之增加。表明在一定的时间范围内，超声作用可使细胞破裂进而促进蛋白的释放，进而增加蛋白得率。当超声时间达到40min时苦荞蛋白的得率达到最大值，随后呈下降趋势，因为长时间的高温及强碱作用会使蛋白质结构破坏，溶解度降低。黄酮类物质得率一直为增长趋势，时间达到60min后增长趋势缓慢，但时间过长会导致杂质的溶出。故选择40min为最佳提取条件。

⑤温度对苦荞蛋白和黄酮类化合物超声辅助同步提取的影响

当超声温度达到65℃时，苦荞蛋白和黄酮类化合物得率均达到最大值，分别为7.97％和1.19％。随着温度继续升高，会使蛋白结构破坏甚至变性，虽然温度的升高促使分子解吸，加快扩散速度，从而提高黄酮得率，但过高的温度容易使黄酮被氧化，也会导致黄酮类化合物的某些部位位置发生变化，母核被破坏，使其得率呈下降趋势。因此提取温度为65℃最为适宜。

（2）响应面优化试验

以Box—Benhnken的中心组合试验设计原理为依据，根据单因素试验结果，选择粒度（A）、pH（B）、温度（C）进行三因素三水平响应面设计同步提取苦荞中荞麦蛋白和黄酮类物质。因素编码水平表见表2，试验设计及结果见表3。

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