乙醚浸提-残余法

一、方法原理

油脂不溶于水，但能溶于乙醚(沸点35℃)、石油醚(30^oC～60^oC )、二硫化碳(46.3℃)、丙酮(56.5^oC)、四氯化碳(70^oC)、三氯甲烷(61 ^oC),苯(80^oC)等有机溶剂中，因此可以用这些溶剂将植物样品中油脂浸提出来，然后加热赶去溶剂即可求得油脂含量。常用的溶剂为无水乙醚及石油醚，因其有低沸点的优点，便于提取；但又有易着火爆炸等缺点，测定时务须严防着火爆炸。这些溶剂除提取出游离态脂肪外，也能提出“类脂肪”，如磷脂、高级醇、色素、蜡以及脂肪酸等脂溶性物质，故称之为“粗脂肪”。

二、仪器及设备

YH-2型脂肪浸提器（图40-2）；切片机；刀片；电热恒温水浴，电热恒温烘箱；索氏脂肪提取器(图40-1)；粉碎机或研钵；圆筒滤纸(直径22×100mm)或脱脂大滤纸。

三、试剂

（1）无水乙醚(C₂H₅O₂H₅，化学纯)或将工业用乙醚放在分液漏斗中，加水洗3次～4次，洗去丙酮及酒精等杂质。再将乙醚放入干燥的试剂瓶中加入固休颗粒状或经750^oC熔化过的CaC1₂，并经常更换CaC1₂，直至加入的CaC1₂固体不再流散为止。这一作用要进行几天，最后将乙醚倒入瓶中蒸馏，得到无水乙醚。或再将乙醚放入另一试剂瓶中，加入几小片擦净的金属钠，放置到不再放出氮气为止。这些操作必须在通风、低温无明火条件下进行。

（2）石油醚(化学纯，沸点30^oC～60⁰C)。

(3)浓碱乙醇洗液:浓NaOH溶液(450 g/L)与工业乙醇按3:1体积比例混合。

4、操作步骤

（1）试样制备：选取有代表性的种子，去除杂质，按四分法缩减取样。小粒种子，如芝麻、油菜籽等取样量不得少于25g。大粒种子，如大豆、花生仁等取样量不得少于30g，将样品预先在80^oC供箱中干燥约2h。谷类、大豆等经粉碎后通过40目筛。

（2）测定：浸提前，先将脂肪浸提器的三个部分（接受烧瓶、浸提筒和冷凝管）洗净、烘干。将滤纸剪成7×7 cm(或其他适当规格)，并叠成一边不封口的纸包(图40-3中8所示)用铅笔编上序号，放入同一编号的称量瓶中。将称量瓶及滤纸包移入105±2℃干燥箱中干燥2h，取出，放入干燥器中冷却至室温(约30min)，准确称滤纸包和称量瓶的质量(mL)，称量时室内相对湿度不得高于70%。

用骨匙将已制备好的样品(谷物1g～2g，油料种子1g左右，不必准确称量)装入滤纸包中封上包口(图40-3中10)，盛于原称量瓶中，放入105士2℃干燥箱中，干燥3h以除去样品中水分，冷至室温后准确称重(m₁)，m₁一m₂即为样品质量(g)。

将样包(已称重)装入浸提筒中，注入乙醚，使之刚好超过样包高度。连接好浸提器的各部分，浸泡一夜。将浸泡后的无水乙醚，流入浸提烧瓶(浸提瓶中加有几粒玻璃珠或浮石)。然后在浸提筒中重新注入无水乙醚，使其完全浸泡样包。连接好浸提器的各部分，接通冷凝水流，在水浴(或灯泡)上进行浸提，并控制温度在45℃左右。室内切忌明火存在，以防止溶剂蒸汽着火燃烧。

抽提时，烧瓶的乙醚加热沸腾后，溶剂的蒸汽由大的侧管进入冷凝管，凝为液体滴入抽提器中，浸提样本并将油脂溶解，当溶剂超过抽提器内虹吸管高度时，溶有脂肪的溶剂就流入烧瓶中，如此反复也将脂肪留于烧瓶内，样本中的油脂不断地被抽提出米。调节水温，使冷凝下滴之乙醚呈连珠状(回流量＞20mL/min)，这时水浴温度大约在70^oC～80^oC，一般须抽提8h～b h(依样品含油量而异)，抽提完毕，取出样包，先在通风处凉干除去乙醚再将各包放入原称里瓶中，而后放在105±2℃下烘2h。稍冷却后，放入干燥器中冷却至室温，称量(m3)。m₁-m₃即为粗脂肪质量，多余的乙醚，可用水浴加热蒸发加以回收，无水乙醚(C₂H₅O₂H₅，化学纯)或将工业用乙醚放在分液漏斗中，加水洗3次～4次，洗去丙酮及酒精等杂质。再将乙醚放入干燥的试剂瓶中加入固休颗粒状或经750^oC熔化过的CaC1₂，并经常更换CaC1₂，直至加入的CaC1₂固体不再流散为止。这一作用要进行几天，最后将乙醚倒入瓶中蒸馏，得到无水乙醚。或再将乙醚放入另一试剂瓶中，加入几小片擦净的金属钠，放置到不再放出氮气为止。这些操作必须在通风、低温无明火条件下进行。

5、结果计算

式中: m₁——称量瓶及滤纸的质量(g)；

m₁——称量瓶、滤纸及供干样品质量(g)；

m₂——称量瓶和浸提后的滤纸及残渣质量(g)。

平行测定的结果用算术平均值表示，保留小效点后两位数字。两次平行测定结果的允许相对相差，谷物不得高于5%，大豆不得高于2%,油料不得高于1.5%。

6、注意事项

如试样为高油脂含量的小粒油料作物种子，须与滤纸包一起放入一小块滤纸在称量瓶中，以各研样和称样时擦净研钵及角匙上的样粒及油迹之用。

参考资料：土壤农业化学分析方法