水溶性糖的测定（四）

4、操作步骤

吸取夏费-索姆吉试剂与还原糖作用生成Cu₂O沉淀，将沉淀用H₂SO₄酸化时，Cu₂O即溶解成Cu⁺。而夏费-素姆吉试剂中的KIO₃与KI在酸化时生成I₂:

KIO₃+5KI+3H₂SO =3K₂S0₄+3H₂0+3I₂

试剂中的KIO₃是定量加入的，所以生成的I₂也是一定量的。生成的I₂与Cu⁺发生氧化还原反应，消耗一部分I₂。

溶液中与Cu⁺反应后所剩余的I₂以淀粉为指示剂，用Na₂S₂O₃标准溶液滴定。

在测定同时做空白标定，以水代替糖试液，由空白标定消耗的Na₂S₂O₃毫升数减去实测待测液消耗的Na₂S₂O₃毫升数，查表39.1即得待测液中还原粮的毫克数。本方法适用于含糖少的蔬菜、牧草等样品。水溶性糖浸出液(水浸出液或乙醉浸出液)50 mL，于100 mL容量瓶中，逐滴加入盐酸溶液(试剂1)5mL,置90℃水浴锅中加热10min。冷却后，加酚酞指示剂2滴～3滴，以氢氧化钠溶液(试剂2)中和至浅红色，加水定容。此时蔗糖等双糖已水解为还原糖:

将转化后的待测液装入滴定管中，滴定煮沸的费林试剂，还原糖与费林试剂的作用如下:

① 林试剂(A)与(B)等体积馄合后，产生下列反应，形成铜的酒石酸络盐；

② 在煮沸的条件下，铜的酒石酸络盐与还原糖作用，将还原糖氧化和降解：

在用待测液测定一定量的费林试剂时，以亚甲基蓝作为氧化还原指示剂。在滴定过程中，稍过量的还原中使氧化型亚甲基蓝的蓝色消失还原成无色的还原型亚甲基盐，即达滴定点。指示剂的变化如下：

还原糖与费林试剂反应的完全程度与滴定时条件(如加热强度、温度、时间等)有关，故必须严格按照规程操作。由于指示剂也能消耗一定量还原糖，所以每次滴定时须按规定加入相同数量的亚甲基蓝。本法适宜于含糖量高的样品(15mL～50mL待测液中含糖50mg)。

5、结果计算

式中:m1——与10mL费林试剂相当的还原糖质量,mg;

V——滴定时所用待测液体积,mL;

ts——分取倍数，本操作为 

10^-3——将mg换算成g的系数。

m——样品质量，g。

参考资料：土壤农业化学分析方法